Panorama general
PTI RatioMaster es un sistema de microscopio de campo amplio basado en monocromador para medir la relación fluoro-fluorescencia o la intensidad del colorante de fluorescencia de las proteínas etiquetadas en concentraciones nanomolares. La microscopía de fluorescencia cruzada es la herramienta definitiva para el estudio de eventos dinámicos en células vivas y estructuras celulares. A diferencia de la microscopía de fluorescencia convencional basada en la intensidad, la rátio-fluorescencia elimina los efectos del fotoblanqueo, la variación de la longitud de la trayectoria celular, la no uniformidad de la carga del colorante y el campo de visión no uniforme, lo que convierte a la rátio-fluorescencia en el método más preciso para determinar las concentraciones de iones intracelulares. Más importante aún, PTI RatioMaster es lo suficientemente rápido como para proporcionar información dinámica esencial sobre las concentraciones de iones y las interacciones con otras moléculas, fármacos o reactivos añadidos.
El PTI RatioMaster es capaz de realizar mediciones dinámicas de fluorescencia en una escala de tiempo de milisegundos. Una lámpara de arco de xenón proporciona una iluminación de banda ancha continua de alta intensidad. Las longitudes de onda de excitación alternas se seleccionan mediante un monocromador de acceso aleatorio de alta velocidad controlado por ordenador acoplado a un microscopio de fluorescencia invertido o vertical (especificado/provisto por el usuario) con una guía de luz líquida. La luz emitida se recoge de la muestra y se pasa a través de un fotómetro que tiene un iris bilateral traducible y un ocular de visión a un detector fotomultiplicador de recuento de fotones analógico conmutable. La detección analógica se utiliza cuando la luz emitida es relativamente intensa; los niveles de luz bajos se detectan mediante recuento de fotones. Todas las funciones del sistema están bajo control informático. Los datos son recopilados y analizados por el software de fluorescencia avanzada basado en Windows FelixGX.
---